Didelio efektyvumo skysčių chromatografija (HPLC) ir kolonėlės chromatografija yra abu junginių atskyrimo ir analizės metodai, tačiau jie labai skiriasi savo principais, sąranka ir pritaikymu.
Štai šių dviejų palyginimas:
1. Principas
Stulpelių chromatografija: Tai bendras metodas, kai mišinys perleidžiamas per kolonėlę, užpildytą stacionaria faze (dažnai silikageliu arba aliuminio oksidu). Mišinio komponentai išsiskiria pagal skirtingą jų giminingumą stacionariai ir judančiajai fazei. Junginiai juda skirtingu greičiu, todėl jie išsiskiria.
HPLC: didelio efektyvumo skysčių chromatografija yra pažangesnė, automatizuota kolonėlės chromatografijos forma. Jis taip pat priklauso nuo stacionarios fazės ir mobiliosios fazės, tačiau jame naudojamas didelis slėgis, kad tirpiklis greičiau išstumtų per kolonėlę, todėl atskyrimas vyksta greičiau ir efektyviau.
2. Greitis
Stulpelių chromatografija: Atskyrimas gali trukti valandas ar net dienas, priklausomai nuo mišinio ir naudojamos stacionarios fazės tipo. Jis veikia lėčiau ir rankiniu būdu.
HPLC: HPLC yra daug greitesnis ir dažnai užtrunka kelias minutes atskirti komponentus, nes naudojamas aukštas slėgis, kuris pagreitina srautą.
3. Rezoliucija ir efektyvumas
Stulpelių chromatografija: paprastai turi mažesnę skiriamąją gebą ir yra mažiau efektyvus nei HPLC, nes atskyrimas nėra toks tikslus, o procesas gali būti labiau rankinis.
HPLC: užtikrina didesnę skiriamąją gebą ir geresnį atskyrimo efektyvumą dėl tikslaus slėgio, srauto greičio ir temperatūros valdymo. HPLC gali atskirti junginius, kurių cheminė struktūra yra labai panaši.
4. Įranga
Stulpelių chromatografija: reikalinga minimali įranga, dažnai tik paprasta stiklinė kolonėlė, tirpiklis, o kartais ir detektorius frakcijoms stebėti.
HPLC: reikalinga sudėtinga sąranka su aukšto slėgio siurbliu, kolonėlė, detektoriumi (dažnai UV, fluorescencija arba lūžio rodikliu) ir kompiuterine sistema duomenims valdyti ir analizuoti.
5. Automatika ir paprastas naudojimas
Stulpelių chromatografija: tai rankinis procesas, kai vartotojas turi supakuoti kolonėlę, įkelti mėginį ir surinkti frakcijas. Tai mažiau automatizuota ir praktiškesnė.
HPLC: Tai labai automatizuota, o nustačius procesas gali vykti be didelio įsikišimo. Vartotojas gali nustatyti konkrečius parametrus, tokius kaip srauto greitis, tirpiklio sudėtis ir aptikimo bangos ilgis.
6. Jautrumas ir aptikimas
Stulpelių chromatografija: paprastai neapima sudėtingų aptikimo metodų; aptikimas pagrįstas vizualiniu stebėjimu arba pagrindiniu trupmenų rinkimu.
HPLC: dažnai suporuotas su labai jautriais detektoriais (UV, fluorescencija, masės spektrometrija), kurie leidžia atlikti analizę realiuoju laiku ir tiksliai įvertinti komponentus.
7. Mėginio tūris
Stulpelių chromatografija: Paprastai naudojamas didesniems mėginių kiekiams, ypač paruošiamiesiems tikslams.
HPLC: Idealiai tinka mažesniems mėginių kiekiams, dažnai naudojamas analitiniais tikslais, kai reikia tikslių kiekių.
8. Programos
Stulpelių chromatografija: Daugiausia naudojamas paruošiamiesiems tikslams, kai reikia išgryninti didelius medžiagos kiekius. Jis dažniausiai naudojamas moksliniams tyrimams arba cheminei sintezei produktams valyti.
HPLC: pirmiausia naudojamas analitiniais tikslais, įskaitant kokybės kontrolę, tyrimus ir farmacinę analizę, siekiant aptikti, identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti junginius. Jis taip pat naudojamas didelio našumo analizei.